Estudi-control d'aigües

Recompte microorganismes.

És el nombre total de microorganismes presents en la mostra. Aquest número és relacionats amb els microorganismes patògens.

S’han desenvolupat tècniques que fan possible que el recompte de microorganismes es faci amb un procés automatitzat. Hi ha diferents tècniques per a dur a terme el recompte de bacteris.

1.Tècniques principals de recompte del numero de microorganismes en una mostra.

Son tècniques que determinen directament el numero total de microorganismes  o indirectament que determinen de una manera aproximada el numero de microorganismes presents en la mostra

• Recompte directe de bactèries al microscopi.

Aquesta es una tècnica per a determinar el numero total de microorganismes de una mostra, s’utilitzen  les cambres de recompte, com la cambra de Petroff-Hauser, i després es visualitza amb l’ajut de un microscopi òptic. Aquet es un mètode ràpid, per te un inconvenient i es que, no es poden distingir quines son les cèl·lules viables, i quines cèl·lules no son viables.

• Recompte directe amb comptadors elèctrics.

Per aquesta tècnica s’utilitza el comptador Coulter, que es l’aparell encarregat de comptar el numero de cèl·lules suspeses en un líquid, al seu pas per un orifici per on flueix un corrent elèctric. Es pot determinar a la vegada el tamany de les cèl·lules, però te el mateix inconvenient que l’anterior, i es que aquesta tècnica tampoc es capaç de diferenciar les cèl·lules viables, de les cèl·lules que no ho son, i tampoc es capaç de diferenciar les cèl·lules vives entre cèl·lules mortes o partícules.

• Recomptes amb filtres de membrana.

En aquesta tècnica el recompte es realitza per filtració de un volum de mostra a traves de un filtre de membrana de un tamany adequat, perquè es puguin retenir bactèries de un tamany mes o menys (depèn del filtre) de 0’22-0’45µm. Un cop s’ha filtrat la mostra que volem analitzar, el filtre es col·loca damunt de un medi de cultiu sòlid i s’incuba, el recompte del numero colònies formades sobre el filtre, determina el numero total de de bactèries en la mostra filtrada. Es una tècnica mol útil quan el numero de microorganismes presents en la mostra es baix.

2.Tècniques de recompte de microorganismes viables en placa.

Aquestes tècniques tenen l’avantatge de que son capaces de quantificar nomes les bactèries que son viables, per dur a terme aquestes tècniques s’han de realitzar de manera seriada, dissolucions de la mostra en solució salina, la inoculació de les dissolucions s’ha de realitzar en un medi de cultiu sòlid, i la incubació a de durar de 24 a 48hores a una temperatura apropiada per el bacteri que volem analitzar.

• Recompte en pla per sembra amb profunditat

Aquesta tècnica consisteix en afegir un medi de cultiu que s’ha de fondre i desprès s’ha de refredar a una temperatura de 50ºC, sobre una placa de petri que a fe contenir el mostra que volem analitzar diluïda. Es tapa la placa i es gira fins que es quedi homogeni. Quan l’agar es solidifica la placa s’incuba. Les colònies es desenvolupen en la placa tant dins de l’agar com en la seva superfície. Aquet es una tècnica que s’utilitza normalment per el recompte de bacteris anaerobis facultatius o microaeròfils.

• Recompte en placa per sembra en superfície.

Aquesta tècnica consisteix en la sembra d’un volum conegut de la dissolució de la mostra sobre la superfície de un medi de cultiu en una placa de petri. En aquesta tècnica totes les colònies creixen en la superfície de els medi de cultiu, generalment s’utilitza aquesta tècnica per el recompte de microorganismes aerobis.