Fonament teòric

La saliva arrossega les cèl·lules de l’epiteli que recobreix les parets internes de la boca i que s’estan desprenent constantment. La sal comuna (NaCl), amb aquesta concentració, és un mitjà hipertònic que provoca l’esclat de les cèl·lules i els nuclis, quedant lliure les fibres de cromatina. El detergent compleix la missió de formar un complex amb les proteïnes histones i separar-les del ADN.

Material

– Sal comuna (1,5 g).
– Bicarbonat de sodi (5 g).
– Aigua mineral (120 ML).
– Rentavaixella (5 ML).
– Saliva de la boca (2 ML, aproximadament).
– 15 ml d’alcohol etílic 96°.

Tècnica de treball

1. Cada participant rep un petit flascó de cristall. En ell diposita 15 ml d’etanol fred que ha pipetejat prèviament.
2. A continuació escup unes deu vegades en l’interior del flascó, tenint la precaució de no haver ingerit cap tipus d’aliment en els 15 minuts previs.
3. Mou lleugerament el flascó perquè es barregin bé.
4. Pipeteja 15 ml d’etanol de 96° fred i ho deixa caure relliscant per les parets del flascó.
5. Espera uns minuts, i observa què passa.
6. Recull, amb molta cura, les fibres blanquinoses que s’han format. tenyeix-les amb blau de metilè.
7. Observa al microscopi

Contesta a les següents preguntes:

1. Fes un dibuix, esquema de tot allò que has observat.
2. Què vol dir hipertònic, isotònic i hipotònic?
3. Què són aquestes fibres blanquinoses que s’han format?
4. Per què posem el filtrat en una dissolució salina de NaCl?
5. Quin reactiu separa les proteïnes que protegeixen l’ADN?
6. A quines conclusions has arribat?

Fonament teòric:

L’extracció de ADN requereix una sèrie d’etapes bàsiques. En primer lloc han de trencar-se la paret cel·lular i la membrana plasmàtica per a poder accedir al nucli de la cèl·lula. A continuació ha de trencar-se també la membrana nuclear per a deixar lliure l’ ADN. Finalment cal protegir l’ADN d’enzims que puguin degradar-lo i per a aïllar-lo cal fer que precipiti en alcohol.

Material:

– una ceba gran fresca
– detergent rentavaixella
– sal
– aigua
– suc de pinya
– alcohol de 96º molt fred
– 1 vas de precipitats de 250 ml
– 1 vas de precipitats de 500 ml
– un ganivet
– una vareta de cristall
– una batedora

Tècnica de treball

– Talla la zona central de la ceba en quadrats
– En un vas de precipitats de 250 ml col·loca 3 culleretes de detergent rentavaixella i una de sal i afegeix aigua fins a 75 ml.
– Barreja aquesta solució amb els trossos de ceba
– Passa el conjunt, amb la batedora, a velocitat màxima durant 30 segons
– Filtra el líquid obtingut.
– Omple fins a la meitat, aproximadament, un got de cristall alt amb la dissolució filtrada.
– Afegeix 3 culleretes de cafè de suc de pinya i barreja bé
– Afegeix un volum d’alcohol molt fred equivalent al del filtrat, curosament, fent-lo relliscar per les parets del got perquè formi una capa sobre el filtrat.
– Deixa reposar durant 2 o 3 minuts fins que es formi una zona tèrbola entre les dues capes. A continuació introdueix la vareta i extreu un embull de fibres blanques d’ADN.

Què ha ocorregut?

La solució de rentavaixella i sal ajudada per l’acció de la batedora és capaç de trencar la paret cel·lular i les membranes plasmàtiques i nuclear.

El suc de pinya conté un enzim, la papaïna, que contribueix a eliminar les proteïnes que puguin contaminar l’ADN.

L’alcohol s’utilitza per a precipitar l’ADN que és soluble en aigua però, quan es troba en alcohol es desenrotlla i precipita en la interfase entre l’alcohol i l’aigua.

Contesta a les següents preguntes:

1. Fes un dibuix, esquema de tot allò que has observat.
2. Què vol dir hipertònic, isotònic i hipotònic?
3. Què són aquestes fibres blanquinoses que s’han format?
4. Per què posem el filtrat en una dissolució salina de NaCl?
5. Quin reactiu separa les proteïnes que protegeixen l’ADN?
6. A quines conclusions has arribat?