Aquest és el protocol de la pràctica de laboratori que farem.
Introducció
El DNA conté tota la informació sobre la identitat biològica dels éssers vius. En els últims anys, els avenços en el camp de la biologia molecular han aconseguit extreure DNA de mostres molt petites. Aquestes tècniques d’extracció i l’estudi posterior per comparació s’utilitzen per establir parentius evolutius a partir de restes fòssils. Són una peça clau de les investigacions policials, ja que s’han convertit en una prova infal·lible per a resoldre delictes que, temps enrere, haguéssin quedat arxivats per sempre.
En aquesta pràctica aprendràs a obtenir el teu propi DNA a partir de les cèl·lules epitelials que hi ha a la saliva.
Per a extreure DNA, primerament necessitem trencar les cèl·lules on es troba protegit; per a fer-ho utilitzem detergent. Més endavant, farem servir alcohol que, per diferència de càrregues, permet separar el DNA de la resta dels components cel·lulars.
Material
- Un got de plàstic d’un sol ús.
- Un vas de precipitats de vidre.
- Aigua de l’aixeta.
- Solució de clorur sòdic (NaCl) al 6%.
- Solució de rentavaixella al 25%.
- Alcohol etílic de 96º.
- Pipetes Pasteur d’un sol ús.
- Unes gotes d’hematoxilina
Procediment
– Abans de començar, posa l’alcohol a la nevera durant uns minuts perquè es vagi refredant.
– Aboca aproximadamaent 5ml d’aigua en el got de plàstic.
– Esbandeix-te la boca amb aigua durant mig minut.
– Aboca el líquid en el vas de precipitats.
-Amb l’ajut d’una pipeta Pasteur, afegeix 5 ml de la solució de NaCl i 5 ml de rentavaixella diluït en el vas de precipitats.
– Barreja-ho suaument amb una vareta de vidre durant uns minuts.
– Inclina el vas i, utilitzant una pipeta Pasteur, diposita amb compte 5 ml d’alcohol. Procura que les gotes vagin relliscant per les parets del got.
-Espera cinc minuts i observaràs com va apareixent una filera de petits grumolls units per un filet blanquinós. És el DNA.
– Pots recollir els fils amb un escuradents de fusta i dipositar-los en un got amb alcohol per veure’ls millor.
– Recull algun dels filaments i col·loca’l sobre un portaobjectes. Afegeix-hi, a continuació, unes gotes d’hematoxilina durant 10 minuts.
– Neteja el portaobjectes amb aigua destil·lada per a eliminar l’excés de colorant, procura no arrossegar els fils de DNA.
– Cobreix la mostra i observa-la al microscopi òptic.
Vés a ‘enllaç:Extracció D’Adn En CèL·Lules Del Fetge De Pollastre